細胞免疫熒光步驟是什么
2017-06-16 14:41:40 來源：360常識網(wǎng)
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導語：細胞免疫熒光步驟對大家來說一定是很陌生的，他是一種抗原抗體反應，好像對我們來說他顯得很遙遠的樣子，因為我們并不了解他能做什么，通過
細胞免疫熒光步驟對大家來說一定是很陌生的，他是一種抗原抗體反應，好像對我們來說他顯得很遙遠的樣子，因為我們并不了解他能做什么，通過這種技術可以讓我們對抗原或抗體的性質(zhì)、定位一次來分析出更多的數(shù)據(jù)。那么細胞免疫熒光步驟是什么呢？
步驟：
1. 細胞一定要貼在玻片上（最好可以放入24孔板），為后面照像打基礎。細胞密度適中，大約60-75%滿片即可，否則容易脫片。
2. 取出細胞后用4%多聚甲醛固定15分鐘，現(xiàn)用現(xiàn)配。（以下各步驟切毋使玻片干燥）
3. PBS沖洗
4. 0.1%Triton作用20分鐘
5. PBS沖洗
6. 10%正常血清封閉10分鐘
7. 加入一抗，4度孵育過夜（找個小瓶蓋將小玻片支起來，抗體就不容易溢出），還要記住“砸片”，就是抗體從較高處落到片子上，以分布均勻。抗體稀釋度1：60，較常用！
8. PBS沖洗4次，各5分鐘
9加入熒光二抗，室溫30分鐘。抗體稀釋度1：400，較常用！
10. 同8。
11. 90%甘油封片。也很關鍵阿，多封幾次才有體會。
12. 避光保存，或到顯微鏡下觀察。
細胞免疫熒光，這對很多人來說都是第一次聽說這個東西，也不知道他對我們會有什么好處與壞處，科學研究就是這樣子的，普通老百姓是不會明白其中的道理的，但是這些研究也是確實的在我們的生活中取得了成果，能夠讓大家過的更加舒適。
